在腫瘤的免疫治療這場(chǎng)沒(méi)有硝煙的戰(zhàn)爭(zhēng)中，只有做到知己知彼，才有可能贏得這場(chǎng)戰(zhàn)爭(zhēng)。通過(guò)生物標(biāo)志物來(lái)了解腫瘤和自身免疫系統(tǒng)的狀態(tài)，能分析出最佳的治療策略。近來(lái)，在臨床醫(yī)學(xué)權(quán)威期刊《Annals of Surgery》上發(fā)表的一篇學(xué)術(shù)性研究表明，程序性死亡配體1（PD-L1）表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞（TIL）狀態(tài)與食管癌的預(yù)后緊密相關(guān)[1]。

本研究共納入2005年1月至2013年6月期間在熊本大學(xué)醫(yī)院接受食管癌根治性切除術(shù)的322例患者。由于17例患者由于術(shù)后無(wú)法獲得可評(píng)估的癌細(xì)胞而被排除，最終納入305例食管癌患者。其中，鱗狀細(xì)胞癌279例(91.5%)，腺癌15例(4.9%)和其他類型11例(3.6%)。該研究分析了入組患者的PD-L1表達(dá)和TIL狀態(tài)。

在305例食管癌患者中，PD-L1表達(dá)陽(yáng)性患者53例(17.4%)，PD-L1表達(dá)陰性患者252例(82.6%)。PD-L1陽(yáng)性組與PD-L1陰性組在年齡、性別、體重指數(shù)、工作狀態(tài)(PS)、飲酒、腫瘤位置、組織學(xué)類型、術(shù)前治療、術(shù)后治療等方面均無(wú)顯著差異。平均隨訪時(shí)間為3.7年。Kaplan–Meier分析顯示，PD-L1陽(yáng)性患者比PD-L1陰性患者的總生存期（OS）（log rank P = 0.016）和無(wú)病生存期（DFS）（log rank P = 0.011）顯著降低（圖1）。

圖1 根據(jù)PD-L1表達(dá)，食管癌患者的OS(A)和PFS(B)

的Kaplan-Meier曲線

由于鱗狀細(xì)胞癌是包括日本在內(nèi)的東方食管癌的主要類型，該研究也分析了PD-L1與鱗狀細(xì)胞癌患者生存率的關(guān)系。研究結(jié)果顯示，PD-L1陽(yáng)性鱗狀細(xì)胞癌患者的OS也明顯低于PD-L1陰性患者（log rank P = 0.014）。在疾病復(fù)發(fā)率方面也觀察到類似的結(jié)果。

TIL，英文全稱Tumor Infiltrating Lymphocyte，中文全稱“腫瘤浸潤(rùn)淋巴細(xì)胞”，是腫瘤細(xì)胞免疫治療中的重要組成部分。手術(shù)切除的腫瘤組織，大部分是腫瘤細(xì)胞，也有少部分淋巴細(xì)胞。通過(guò)把從手術(shù)切除的腫瘤組織中分離擴(kuò)增TIL細(xì)胞（擴(kuò)增出來(lái)的細(xì)胞主要是CD4+和CD8+ T細(xì)胞），然后體外培養(yǎng)一段時(shí)間得到足夠多的TIL細(xì)胞，回輸?shù)交颊唧w內(nèi)來(lái)發(fā)揮抗癌作用（圖2）。由于PD-1/PD-L1抑制劑發(fā)揮作用，也需要腫瘤附近淋巴細(xì)胞的參與，所以TIL的豐度也可以作為預(yù)測(cè)PD-1/PD-L1抑制劑療效的標(biāo)志物，通常是使用免疫組化評(píng)估腫瘤組織CD8+T細(xì)胞的浸潤(rùn)情況來(lái)實(shí)現(xiàn)。

圖2腫瘤特異性TIL制備的全過(guò)程

Rosenberg,S.A. (2008) Nature Review 8, 299-308

本研究中也發(fā)現(xiàn)，TIL陽(yáng)性與CD8表達(dá)顯著相關(guān)。Kaplan -Meier分析顯示，TIL陽(yáng)性組比陰性組具有更長(zhǎng)的OS（log rank P < 0.0001）（圖3A）和DFS（log rank P < 0.0001）（圖3B）。

圖3 根據(jù)TIL狀態(tài)，食管癌患者的OS(A)和PFS(B)

的Kaplan-Meier曲線

PD-L1和TILs均是具有潛力的標(biāo)志物，若將他們結(jié)合分析是否能夠更加精準(zhǔn)？科學(xué)家們根據(jù)PD-L1表達(dá)和TIL狀態(tài)將食管癌患者分為4組（表1）。不同PD-L1表達(dá)和TIL狀態(tài)患者的 OS和DFS見(jiàn)圖4。

表1 患者不同的PD-L1表達(dá)和TIL狀態(tài)

圖4 根據(jù)PD-L1表達(dá)和TIL狀態(tài)，食管癌患者的OS(A)和DFS(B)的Kaplan-Meier曲線

Type I: PD-L1+/TIL+

Type II: PD-L1-/TIL-

Type III: PD-L1+/TIL-

Type IIV: PD-L1-/TIL+

結(jié)果發(fā)現(xiàn)：

1. PD-L1陽(yáng)性組（n=53）：

TIL陽(yáng)性組比TIL陰性組有更好的DFS（log rank P = 0.019）。

2. PD-L1陰性組（n=252）：

TIL陽(yáng)性組比TIL陰性組有更好的OS（log rank P = 0.001）和DFS（log rank P < 0.0001）。

結(jié)論：

與PD-L1陰性患者相比，PD-L1陽(yáng)性患者的OS和PFS顯著下降。TIL陽(yáng)性患者則比TIL陰性患者具有更長(zhǎng)的OS和PFS。PD-L1表達(dá)和TIL狀態(tài)可以作為預(yù)測(cè)性生物標(biāo)志物，并且可以指導(dǎo)患者能否參加PD-1 / PD-L1抑制劑相關(guān)的臨床試驗(yàn)。

對(duì)于PD-1/PD-L1抑制劑來(lái)說(shuō)，使用免疫組化方法對(duì)PD-L1的表達(dá)定量作為標(biāo)志物是順其自然的事情。臨床上，在使用Keytruda（第一個(gè)獲得FDA批準(zhǔn)的PD-1抑制劑）前，檢測(cè)出PD-L1高表達(dá)（≥50%）的腫瘤患者可以在治療中獲益。大量的研究也表明，PD-L1高表達(dá)的患者比PD-L1低表達(dá)的患者用藥后，具有更好的療效。但免疫治療是一個(gè)非常復(fù)雜的體系，標(biāo)志物之間往往不是獨(dú)立的，而往往是存在千絲萬(wàn)縷的關(guān)系。綜合考慮多個(gè)標(biāo)志物的水平，肯定是會(huì)比只考慮一方面的標(biāo)志物更為全面可靠。

隨著液體活檢技術(shù)的興起，通過(guò)檢測(cè)游離于外周血中的腫瘤細(xì)胞，進(jìn)一步分析PD-L1表達(dá)，在臨床上有益于醫(yī)生進(jìn)一步制定適合患者的治療方案，有益于將PD-1/PD-L1藥物推向一線治療。大量研究表明，CTC-PD-L1表達(dá)也是可靠的生物標(biāo)志物（①全球首個(gè)精確預(yù)測(cè)PD-1免疫治療效果的液體活檢方法誕生了！②“1+1大于2”,PD-1聯(lián)合阿帕替尼效果好，抽血代替活檢，CTC預(yù)測(cè)療效顯身手③捷報(bào)頻傳——PD-L1在三陰乳腺癌又建奇功）。

未來(lái)臨床上，更優(yōu)秀的預(yù)測(cè)方法，一定是提取多個(gè)維度的特征，多種生物標(biāo)志物結(jié)合分析，采用多種檢測(cè)手段，這才更加符合精準(zhǔn)醫(yī)療的需求。

參考文獻(xiàn)

[1]Yagi T, Baba Y, Ishimoto T, et al. PD-L1 Expression, Tumor-infiltrating Lymphocytes, and Clinical Outcome in Patients With Surgically Resected Esophageal Cancer [J] Annals of Surgery, 269(3):471–478.